pi染色检测细胞凋亡原理（pi染色检测细胞凋亡参数）

投稿用户 • 2022年7月25日 pm7:46 • 范文大全 • 阅读 310

原创Lv ZQ 抗菌科技圈

第一作者：Chen Yongjiu

通讯作者：Zheng Nanfeng，Liu Sijin

通讯单位：厦门大学，中国科学院大学

研究速览

近期，厦门大学和中国科学院大学科研团队在NPG ***sia Materials上发表了有关两亲性银纳米团簇对多重耐药性细菌（MDRB）的抗菌研究工作。抗生素的滥用致使了MDRB的产生，对人类的健康构成了严重的威胁，寻找对抗MDRB的非抗生素方案已经迫在眉睫。银纳米材料（***gNPs）是常用的非抗生素型抗菌材料，然而，其MDRB的杀灭能力仍有待加强。针对这些问题，该论文利用超小尺寸的银纳米团簇（***gNCs）作为抗菌材料，实现了对于MDRB（铜绿假单胞菌，P. aeruginosa）灭活。***gNCs抗菌剂的特点在于：一方面，由于两亲性配体的存在，***gNCs相对容易与细胞膜结合并从而实现内吞；另一方面，***gNCs的纳米簇结构可以产生大量的活性氧（ROS），进一步提升其抗菌活性。总而言之，***gNCs基抗菌剂在杀灭MDRB方面表现出了巨大的前景。

要点分析

要点一：成功合成了两亲性的***gNCs: ***gNCs在H2O和CH2Cl2中均表现出良好的溶解性。

要点二：两亲性使得***gNCs更容易被细菌摄取：亲水性抗菌剂（如***gNPs）穿过细菌膜时，会被细菌膜的疏水基团所阻碍（范德华力），必须克服更多的能量才能穿透膜。而两亲性***gNCs则可以顺利穿过细菌膜。从而更容易被细菌摄取。

图文导读

图1：（a）不同因素的对MIC值（最低抑菌浓度）的影响。（b）不同尺寸对于不同菌株的MIC值的影响。（c）***gNPs（#1和#2）和***gNCs结构示意图。（d）溶于水和CH2Cl2的***gNPs和***gNCs的图像，反映了它们的亲水性和两亲性特征。（e）***gNPs#1、***gNPs#2和***gNCs的紫外/可见光吸收光谱。

图2.（a）从OD600=0.1开始，记录细菌随时间的生长曲线，***gNPs和***gNCs浓度为6.4μg/mL的***gNPs和***gNCs。（b）以3.2μg/mL和6.4μg/mL的***gNPs#1、***gNPs#2和***gNCs处理细菌24h后的抗菌性能对比图像，以及（c）CFU（菌落数量）计数。

图3.（a）和（b）***gNCs和***gNPs类过氧化物酶性质的测定。TMB（3,3'，5,5’-四甲基联苯胺）反应在370和652nm处的颜色变化和最大吸光度值。（c）P. aeruginosa细胞在暴露于6.4μg/mL的***gNPs和***gNCs后随时间的相对ROS生成。（d）P. aeruginosa细胞在暴露于6.4μg/mL的***gNPs和***gNCs，6h后产生的***TP总量。（e）根据OD600值将细菌数量标准化，测定6.4μg/mL***gNPs和***gNCs作用6h后P. aeruginosa细胞的相对***TP产量。

图4.（a）TEM图像显示了6h后***gNCs和***gNPs与P. aeruginosa细胞的相互作用。蓝色箭头表示细胞外的聚集颗粒，红色箭头表示细胞内的***gNCs，橙色箭头指向细菌碎片。放大的图像显示了***gNCs、***gNPs和细菌之间的详细相互作用。（b）用6.4μg/mL的***gNPs和***gNCs对P. aeruginosa处理6小时后，对细胞壁/膜进行丙啶（PI）染色（红色）。共聚焦显微镜观察图像（×600，原始放大倍数）显示损伤程度。（c）PI染色阳性细菌的数量。（d）用***gNPs和***gNCs处理6h后的MD***（丙二醛，脂质过氧化的产物）水平。（e）和（f）6h后P. aeruginosa对***gNPs和***gNCs的摄取量，（e）***g的总质量，（f）与细菌膜结合的***g的质量。（g）***gNCs和***gNPs的与膜结合***g与总量***g之间的比率。

图5.（a）***gNPs，***gNCs和细菌膜的相互作用示意图。（b）***gNPs/***gNCs和LPS/DPPE分子之间的相互作用能。负值表示吸引相互作用，正值表示排斥相互作用。

图6.（a）使用***gNPs和***gNCs治疗由P. aeruginosa引起的肺部感染小鼠的实验步骤的示意图。（b）使用不同材料治疗的小鼠48h的存活率。（c）用***gNPs和***gNCs治疗48h后，对小鼠支气管肺泡灌洗液的CFU值。（d）用***gNPs和***gNCs治疗7天后，对小鼠肺切片进行H&E染色图像。（e）用***gNPs和***gNCs治疗后小鼠血清中的胆红素的总量。

结论

综上所述，尺寸较小的***gNCs对耐药性P. aeruginosa的抑制作用优于常规***gNPs，展现出对于耐药细菌灭活的潜力。主要结论如下：

1. 含两亲配体的***gNCs相对于***gNPs更容易穿过细菌外膜，可造成膜损伤，从而增强了***gNCs与细菌细胞内生物分子相互作用的可能性。

2. ***gNCs具有较强的过氧化物酶活性和促进活性氧生成的能力。因此，***gNCs对耐药性P. aeruginosa表现出优异的抗菌性能。

3. ***gNCs具有良好生物相容性，并且对于由P. aeruginosa导致的肺炎小鼠具有良好治疗效果。

全文链接：https://doi.org/10.1038/s41427-020-00239-y

参考文献：Yongjiu Chen, Liting Ren, Lingxiao Sun, Xuan Bai, Guoqiang Zhuang, Bin Cao, Guoqing Hu, Nanfeng Zheng and Sijin Liu. ***mphiphilic silver nanoclusters show active nano–bio interaction with compelling antibacterial activity against multidrug-resistant bacteria. NPG ***sia Materials, 2020, 12(1): 1-15.

投稿联系：kangjunkejiquan@163.com

............试读结束............

查阅全文加微信：3231169

如来写作网：gw.rulaixiezuo.com（可搜索其他更多资料）

本文内容由互联网用户自发贡献，该文观点仅代表作者本人。本站仅提供信息存储空间服务，不拥有所有权，不承担相关法律责任。如发现本站有涉嫌抄袭侵权/违法违规的内容，请发送邮件至 3231169@qq.com 举报，一经查实，本站将立刻删除。
如若转载，请注明出处：https://www.haowenren.com/5634.html

pi染色检测细胞凋亡原理（pi染色检测细胞凋亡参数）

相关推荐